酒精使用障礙（Alcohol use disorder, AUD）是一種慢性腦部疾病，其特征是消極、負性的情感狀態（負性情緒）、過量的酒精攝入。目前對於AUD共病負性情緒患者的治療手段及策略十分有限。
溶血磷脂酸（LPA）是甘油磷脂訊號分子的重要成員，主要由溶血磷脂酰膽堿（LPC）在溶血磷脂酶D的水解作用下生成，並透過G蛋白偶聯受體LPA1-6發揮重要的調控作用；LPA-LPA1訊號在中腦邊緣系統和背側間腦傳導系統中表達豐富，調節興奮/抑制性神經遞質的動態平衡。
外側韁核（Lateral habenula，LHb）可調節多巴胺能和血清素能系統，是連線前腦和中腦單胺能神經核團的一個重要樞紐。LHb核團內的谷胺酸傳遞系統功能增加與AUD共病負性情緒至關重要。
基於以上研究背景， 中山大學醫學院付饒副教授團隊 於2023年4月14日在Neuropsychopharmacology雜誌發文，揭示了 外側韁核中的LPA-LPA1訊號參與調節與AUD相關的負性情緒狀態 。
該研究建立了 間歇性進入兩瓶選擇性範式飲酒（Intermittent access to 20% ethanol two-bottle free choice drinking, IA2BC）模式的Long-Evans大鼠模型，慢性飲酒8周後對大鼠進行48小時急性酒精戒斷（Post-EtOH） ；透過一系列行為學測試明確LE大鼠表現出明顯的焦慮及抑郁樣改變；使用免疫熒光染色、分子生物學技術明確了與皮層和海馬組織相比，LHb內LPA的主要生成酶-ATX（ Enpp2 ）的表達量明顯增高，提示LHb是LPA的主要來源核團；ATX訊號（ATX與NeuN、vGlut2共標）主要定位於LHb谷胺酸能神經元的細胞膜，且ATX的表達在Post-EtOH大鼠LHb中增多，在細胞膜上的分布從點狀變為片狀，表達範圍增大；明確Post-EtOH大鼠LHb中，LPA代謝紊亂，表現為ATX/ Enpp2 的蛋白/mRNA水平顯著增加，水解酶LPPR4/ PRG-1 水平顯著降低；LPA1和LPA3受體較Naïve大鼠表達增多。
透過免疫組化技術，發現Post-EtOH大鼠LHb神經元強表達c-Fos，且c-Fos與ATX的共標率可達65.25%±3.50%；分子生物學實驗發現：PKC激酶γ亞型在LHb中表達豐富，且在Post-EtOH大鼠LHb表達進一步升高；同時測量AMPAR受體亞基組分的mRNA水平，得到 GluA1 增多、 GluA2 減少， GluA1/GluA2 比值增高，提示神經元內鈣訊號傳導增強；western blotting結果顯示Post-EtOH大鼠LHb內的βCaMKII-AMPAR訊號分子表達增強，GluA1亞基ser831位元點發生磷酸化調控。內源性免疫共沈澱技術，發現LPA1與p-GluA1ser831存在相互作用，但LPA3未與p-GluA1ser831發生互作，提示在LHb內LPA1受體與βCaMKII-AMPAR訊號間存在相互作用。 皮爾森相關性分析得到LPA1的表達與大鼠在高架十字迷宮EPM測試中進入開放臂的次數呈顯著負相關，PKC-γ的表達與大鼠在基線期的酒精攝入呈顯著正相關；提示LPA1和PKC-γ在AUD共病負性情緒中的重要地位 。
最後，采用腦立體定位手術，LHb原位微註射LPA-LPA1/3受體拮抗劑或PKC-γ抑制劑，均能下調PKC-γ、βCaMKII、AMPAR訊號分子的表達水平，減少酒精大鼠的負性情緒行為和神經元的興奮性，降低酒精消耗量。LHb原位註射外源性18:1 LPA可以啟用LPA-LPA1/3受體，上調PKC-γ、βCaMKII、AMPAR訊號分子的表達水平，增強神經元的興奮性，誘導Naive大鼠產生AUD共病負性情緒表型。但是外源性LPA不能加重Post-EtOH大鼠的負性情緒及酒精消耗量。
總之，LHb內「LPA-LPA1-PKC-γ/βCaMKII-AMPAR-GluA1ser831磷酸化-神經元興奮性增強」訊號分子機制，在AUD共病負性情緒發病機制中和病理行程中有著重要的作用； LPA1和PKC-γ可作為防治AUD共病負性情緒疾病的分子靶標 。
