我们都知道，太阳紫外线辐射(UV)通过直接吸收UVB或间接通过UVA介导的光敏作用致使皮肤DNA损伤。最近的研究发现，暴露在UVA下数小时后，会激发诱导黑素细胞产生环丁烷嘧啶二聚体(CPD)。这种UVA诱导的延迟CPD构成了黑素细胞中的大部分CPD。这些发现表明，暴露在阳光数小时后会损害皮肤，因此在这之后需要使用护肤产品。
在这个背景下，研究人员将菊花提取物(Chrys)与维生素C衍生物抗坏血酸-2-葡萄糖苷(AA2G)混合，发现其具有保护作用，能够调控活性氧、黑色素形成和UVA诱导的CPD。
具体来说，研究人员用DHR123染料测定表皮角质形成细胞内ROS水平；以B16细胞检测黑素生成抑制效果。至于CPD的测量，则采用黑色素-a细胞和活性物组别孵育6天，然后用不同剂量的UVA照射，并测量荧光强度来测定CPD水平。
来看看具体的实验结果：
1. 抑制细胞内ROS产生
与对照相比，使用0.5%w/v AA2G后，细胞内ROS产量降低了31%。虽然相对于AA2G有所不足，但与对照相比，菊花提取物Chrys依然表现出显著的剂量依赖性的ROS抑制，分别为0.33% w/v下抑制率11%和1% w/v下抑制率18%。不同浓度的Chrys和AA2G组合对ROS活性有较好的抑制作用。0.5% w/v AA2G + 1.0% w/v Chrys混合溶液的活性最强，其ROS水平降低了44%。此浓度下，未观察到细胞毒性。
2. 预防黑色素的生成
在B16黑素瘤细胞系中测试了Chrys、AA2G和这两种物质复合后(不同浓度)抑制黑素生成的功效。图2为不同试验浓度和组合下的相对黑色素含量。AA2G (0.5% w/v)及其与Chrys(0.11、0.33和1% w/v)的不同组合显示出明显的剂量依赖性黑素抑制作用，而单独使用Chrys (1% w/v)则没有观察到任何抑制作用。
3. 防止CPD形成
为了确定AA2G和AA2G + Chrys组合是否能防止CPD的形成，Mel-a细胞用活性物质预处理6天，然后暴露于UVA (150 kJ/m2)下。如表1所示，无论UVA暴露与否，细胞活力均未受影响。
UVA处理后，数小时内诱导CPD形成，并在24小时达到峰值。0.5% w/v AA2G在2、4、8和24小时时降低了CPD的形成。0.5% w/v AA2G + Chrys(0.11、0.33和1% w/v)共混物在各时间点均表现出预防CPD生成的作用。不同于Chrys + AA2G共混物在ROS抑制活性上的剂量依赖性，A在A2G + Chrys共混物中，Chrys浓度在防止CPD形成方面没有观察到剂量依赖性。有趣的是，在2小时时间点，0.5% w/v AA2G + Chrys(0.11、0.33和1% w/v)组合比对照组减少了约95%的CPD，0.5% w/v AA2G减少了63%的CPD。在24小时时间点，0.5% w/v AA2G + Chrys(0.11、0.33和1% w/v)混合剂使CPD水平降低了约75%，0.5% w/v AA2G使CPD水平降低了55%。这些发现表明，与单独的AA2G相比，AA2G + Chrys共混物表现出更强的疗效。CPD的染色图同样也显示出相同的结果趋势。
总结来说，这项研究的结果表明，使用天然抗氧化剂：菊花花提取物与众所周知的抗坏血酸衍生物AA2G，可以增强对延迟DNA损伤(CPD形成)的保护。这种组合策略可以用于配制一种更有效的护肤品，帮助缓解日光照射后的皮肤损伤。
